快速檢測卡采用阻斷法來定性地檢測禽類血清中的抗體,對于不同亞型的病毒抗體都有很好的敏感性,與HI方法有很好的相關(guān)性。
在試紙的樣品墊預(yù)先包埋有抗原,血清中的相應(yīng)抗體先與樣品墊包埋的抗原反應(yīng),從而抑制了其與檢測線(T線)上抗體的反應(yīng),使得檢測線不顯示紅色線條。反之,樣品墊上的抗原隨液體流動,與膠體金偶聯(lián)抗體和檢測線抗體形成復(fù)合物,使得檢測線顯示紅色線條。
豬瘟抗體快速檢測卡操作步驟:
一、血清制備
按常規(guī)方法抽取2-3ml血液置潔凈干燥的試管中,靜置0.5-1小時待血液凝固后于4000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘(也可將血液靜置1-2小時,待血液凝固自然析出血清),分離血清。要求血清清亮,無溶血、無污染。血清樣品短期可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
二、操作方法
1.在檢測卡的加樣孔內(nèi)加入2滴(約80ul)待檢血清樣品。
2.將檢測卡平放于桌面上,在室溫下靜置5-20分鐘內(nèi)判定結(jié)果,超過20分鐘的結(jié)果只能作為參考。
三、注意事項
1.檢測前請仔細(xì)閱讀說明書,本產(chǎn)品提供的各種試劑僅供本實驗用;
2.檢測卡從冰箱中取出時應(yīng)恢復(fù)到室溫后打開,打開的檢測卡應(yīng)盡快使用以免受潮后檢測卡將失效;
3.待檢血清樣品應(yīng)新鮮清亮,溶血的樣品不可用于檢測;
4.實驗的廢棄物應(yīng)按污染物處理規(guī)定妥善處理。
四、結(jié)果判斷
1.陰性:在觀察孔內(nèi),只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
2.陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線。抗體滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
3.弱陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線,但檢測線區(qū)(T)出現(xiàn)的顏色很淺。
6.失效:在觀察孔內(nèi),對照線區(qū)(C)和檢測線區(qū)(T)都不出現(xiàn)色線;或僅檢測線區(qū)(T)出現(xiàn)色線。